BRAF och KRAS har en vital roll i growth factor receptor (EGF-R) cellsignalering. Muterade former är potenta inom onkogenesen vilket man har funnit vid många cancertyper hos människa (t.ex. colorectalcancer, pankreas-cancer, lungcancer, leukemi). Den mest kritiska regionen för KRAS genen för onkologisk aktivering är mutationer i codon 12 och 13, som orsakar att proteinet lagras i ett aktivt GTP-bundet tillstånd.

KRAS genen i människa kodar för en homolog av en transformationsgen isolerad från Kirsten rat sarcoma virus. Likt andra inom ras gen familjen (H-ras, N-ras), är KRAS proteinet ett 21 kD GTPas och utgör en tidig aktör i många signaltranduktions-vägar.

Wildtype KRAS har en vital roll i den normala cellsignaleringsprosessen, inklusive prolifiering, differentiering och åldrande. Muterade former av genen är potenta inom onkogenesen vilket man har funnit vid många cancertyper hos människa (t.ex. colorectalcancer, pankreas-cancer, lungcancer, leukemi). Den mest kritiska regionen för KRAS genen för onkologisk aktivering är mutationer i codon 12 och 13, som orsakar att proteinet lagras i ett aktivt GTP-bundet tillstånd.

KRAS mutationer har visat sig vara prediktiva för den respons som kan åstadkommas vid cancerterapi med anti-EGFR monoklonala antikroppar, som t.ex. panitumumab/Vectibix®, cetuximab/Erbitux® och tyrosin kinas inhibitorer (erlitinib/Tarceva®, gefitinib/Iressa®). Bland BRAF mutationer är V600E (tidigare benämnd V599E) särskilt ofta iakttagen (>90%). BRAF V600E har också visats vara prediktiv för respons vid behandling med vissa anti-EGFR monoklonala antikroppar såsom t.ex. cetuximab/Erbitux och panitumumab/Vectibix, som godkänts för terapi vid colorectalcancer. Studier har visat att verkan av behandlingen med dessa antikroppar är begränsad till patienter med BRAF wild type tumörer.

BRAF V600E screening har dessutom beskrivits som en kostnadseffektiv väg för att förenkla genetisk testning för hereditär non-polyposis colorectalcancer (HNPCC).
 

Muterade alleler är detekterbara vid en förekomst av mindre än 1 % i en bakgrund av wild-type.

Strip Assay kiten innehåller bruksfärdigt reagens till 20 tester. Analysen kan utföras i tre enkla steg på mindre än 6 timmar, manuellt eller automatiserat.
 

Kiten är baserade på revers-hybridisering av biotinylerade PCR produkter till en parallellarray med allel-specifika oligonukleotider immobliserade på ett membranteststrip. Denna strips assay har bruksfärdiga reagens för genomförande av följande tre steg:

1.     PCR för amplifiering av mutant KRAS codon 12 och 13 och BRAF V600E sekvenser i närvararo av wild-type supressor.

2.     Hybridisering av biotinilerade amplifierings-produkter till oligonukleotid proberna på testremsan.

3.     Detektering av specifikt bundna mutanter av KRAS alleler och PCR kontroll med en synlig enzymatisk färgreaktion.

En av två möjliga reaktioner kan avläsas:

1.     Alla KRAS prober är negativa, kontrollen positiv: - ingen av KRAS mutationerna finns närvarande.

2.     En eller flera KRAS prober positiva, kontrollen positiv: - en eller flera KRAS mutationer förekommer.