Abakavir är en nukleosidanalog reverse transkriptas-hämmare som
används vid behandling av HIV-1-infektion. Cirka 5% till 8% av
kaukasier med HIV-1-infektion som genomgår en antiretroviral
kombinationsbehandling som innehåller abakavir utvecklar en
överkänslighet. Manifestationer debuterar vanligen inom 6 veckor efter
påbörjad behandling och inkluderar multisystemsengagemang som ger
hudutslag, feber, konstitutionella symtom, mag-tarmkanalssymtom eller
andningssymtom som blir allvarligare vid fortsatt behandling.
Omedelbar och permanent avbrott av behandlingen leder till en snabb
återgång av biverkningarna. Omvänt kan fortsatt behandling med
abakavir efter en överkänslighetsreaktion provocera till potentiellt
livshotande tillstånd. Att etablera rutinmässig screening för
HLA-B5701 innan behandling sätts in minskar signifikant incidensen för
överkänslighetsreaktioner på grund av abakavir.
|
|
|
HLA-B5701 RealFast™ Assay är ett snabbt och korrekt realtids-PCR-test
för detektering av HLA-B5701 allelen, en specifik variant av
HLA-antigen B (HLA-B) genen som är starkt associerad med
överkänslighet mot abakavir. Kitet är avsett för genetisk
riskstratifiering av HIV-infekterade patienter innan behandlingen med
abakavir terapi sätts in. HLA-B5701 positiva patienter måste undantas
från abakavirbehandling. Den kvalitativa analysen påvisar närvaro
eller frånvaro av HLA-B5701 i ett genomiskt DNA-extrakt. Kitet
interfererar inte med närbesläktade HLA-B5702 och HLA-B5703-varianter. |
|
|
|
Testet baseras på den fluorogena 5'nukleasanalysen, brukar även kallas
TaqMan prober. Varje reaktion innehåller genspecifika primerpar som
amplifierar ett 97 bp fragment på HLA-B5701 genen och ett 147 bp
fragment på en kontroll gen, den senare utgör PCR-kontroll.
Ytterligare komponenter är två dubbelmärkta, genspecifika
hydrolysprober som hybridiserar till målsekvensen på motsvarande
fragment. Närheten mellan den 5'-fluorescerande reporter och det
3'-utsläckande färgämnet på intakta prober hindrar reportern från att
fluorescera. Under förlängningsfasen i PCR klyver 5 '- 3'
exonukleasaktiviteten hos Taq DNA-polymeras 5'-fluorescerande reporter
från den hybridiserade proben. Den fysiska separationen av fluoroforen
från det utsläckande färgämnet ger en fluorescerande signal i realtid,
som är proportionell mot den ackumulerade PCR-produkten |
|
I prover positiva för HLA-B5701, FAM-märkt
HLA-B5701 prob samt HEX-märkt PCR-kontrollprob binder båda till
lämpligt genfragment. En stark fluorescenssignal detekteras i
FAM-kanalen (520 nm) och HEX-kanalen (556 nm). I prover som är
negativa för HLA-B5701 hybridiseras enbart HEX-märkt PCR-kontrollsond
till den komplementära strängen hos kontrollgenfragmentet. En stark
fluorescenssignal detekteras i HEX kanalen och ingen eller endast en
baslinjesignal i FAM-kanalen.
Kitet innehåller reagens för 100 reaktioner med
en slutlig volym på vardera 20 μl.
|
|
Best.nr. |
Benämning |
Specifikation |
|
7-610 |
RealFast™ Assay
HLA-B5701 |
Detekterar HLA-B * 57: 01 alleler, som är associerade med
överkänslighet mot anti-HIV-läkemedel abacavir |
|
|
|
